色譜柱在使用前，最好進(jìn)行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進(jìn)行，只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。

 

樣品的前處理過程：

 

(1) 最好使用流動相溶解樣品。

(2) 使用預(yù)處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。

(3) 使用0.45μm或0.22μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。

 

實際使用中，液相色譜柱有可能會失效，常見的原因有：

 

1、色譜柱裝填不良

 

裝填不良的色譜柱，在短時間應(yīng)用后，填充床的壓縮通常使柱頭處產(chǎn)生塌陷，導(dǎo)致柱效突然降低。液相色譜儀色譜柱的初始評價指標(biāo)，如塔板數(shù)、不對稱因子等往往不能很好地表征色譜柱床層的穩(wěn)定性，這種情緒只能在實際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)。

 

2、壓力因素

 

液相色譜儀色譜柱使用過程中的驟然壓力波動、機(jī)械撞擊或溫度驟然變化都會對色譜柱床層產(chǎn)生影響，導(dǎo)致峰形變差和柱效降低。進(jìn)樣過程中，進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)動太慢可引起壓力波動，使色譜柱床產(chǎn)生裂隙，在柱切換時也存在同樣的問題。使用填充良好的色譜柱，在較低柱壓下操作，可大大減少由壓力波動造成的色譜柱損壞。